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技術文章

顯微鏡的使用

實驗目的要求

人的眼睛只能識別大小為0.1㎜的物體。顯微鏡是精密的放大儀器，是生物學研究不可缺少的工具。我們用它可以觀察肉眼看不見的微小生物的結構。中學*常用的是光學顯微鏡，為了正確操作、妥善保管和維護顯微鏡，使之延長使用年限，我們必須首先了解顯微鏡的結構和功能。

一臺顯微鏡包括機械裝置和光學系統兩大部分，注意比較和識別。

（一）機械部分

1．鏡筒  為顯微鏡上部圓形中空的長筒，筒口上端安裝目鏡，下端與物鏡轉換器相連。作用是保護成像的光路與亮度。

2．轉換器　固著在鏡筒下端，分兩層，上層固著不動，下層可自由轉動。轉換器上有2～4個圓孔，用來安裝不同倍數的低倍或高倍物鏡。

3．粗準焦螺旋　位于鏡臂的上方，可以轉動，以使鏡筒能上下移動，從而調節焦距。

4．細準焦螺旋　位于鏡臂的下方，它的移動范圍較粗準焦螺旋小，可以細調焦距。

5．鏡座　是位于鏡臂的下方，顯微鏡的底部，呈馬蹄形的金屬座。用以穩固和支持鏡身。

6．鏡柱　從鏡座向上直立的短柱。上連鏡臂，下連鏡座，可以支持鏡臂和載物臺。

7．傾斜關節　鏡柱和鏡臂交界處有一個能活動的關節。它可以使顯微鏡在一定的范圍內后傾（一般傾斜不得超過45°）便于觀察。但是在使用臨時封片觀察時，禁止使用傾斜關節，尤其是裝片內含酸性試劑時嚴禁使用，以免污損鏡體。

8．載物臺　從鏡臂向前方伸出的金屬平臺。呈方形或圓形，是放置玻片標本的地方。其中央具有通光孔，在通光孔的左右有一個彈性的金屬壓片夾，用來壓住載玻片。較**的顯微鏡，在載物臺上常具有推進器，它包括夾片夾和推進螺旋，除夾住切片外，還可使切片在載物臺上移動。

（二）光學部分

1．目鏡　它是安裝在鏡筒上端的鏡頭。是由一組透鏡組成的，它可以使物鏡成倍地分辨、放大物像，例如 5×、10×、15×、20×。

2．物鏡　是決定顯微鏡質量的關鍵部件。安裝在轉換器的孔上，也是由一組透鏡組成的，能夠把物體清晰地放大。一般有三個放大倍數不同的物鏡，即：低倍物鏡（8×或10×）、高倍物鏡（40×或45×）和油浸物鏡（90×或100×），根據需要可選擇一個使用。顯微鏡的放大倍數是目鏡倍數乘以物鏡的倍數。

3．反光鏡　在聚光器的下面有一個一面平另一面凹的雙面圓鏡。可作各種方向的翻轉，光線較強時使用平面鏡，反之使用凹面鏡。

4．聚光器　（學生用顯微鏡一般沒有這個裝置）是由凹透鏡組成的，它可以集中反光鏡投射來的光線。在鏡柱前面有一個聚光器調節螺旋，它可以使聚光器升降，用以調節光線的強弱，下降時明亮度降低，上升時明亮度加強。

5．虹彩光圈　又稱可變光闌，由多數金屬片組成（學生用顯微鏡一般沒有這個裝置），在較**的顯微鏡上具有此裝置。使用時移動其把柄，可控制聚光器透鏡的通光范圍，用以調節光的強度。虹彩光圈下常附有金屬圈，其上裝有濾光片，可調節光源的色調。

6．遮光器　簡單的顯微鏡無聚光器和虹彩光圈，而裝有遮光器。遮光器呈圓盤狀，上面有大小不等的圓孔（光圈）。光圈對準通光孔，可以調節光線的強弱。

顯微鏡的成像原理（放大原理）

光線→反光鏡→遮光器→通光孔→標本（一定要透明）→物鏡的透鏡（**次放大成倒立實像）→鏡筒→目鏡（再放大成虛像）→眼。

顯微鏡的使用

1．取鏡安放

取鏡  右手握住鏡臂，左手平托鏡座，保持鏡體直立。（特別要禁止單手提著顯微鏡走，防止目鏡從鏡筒中滑脫）。

安放  放置桌邊時動作要輕。一般應在身體的前面，略偏左，鏡筒向前，鏡臂向后，距桌邊7～10㎝處，以便觀察和防止掉落。安放目鏡和物鏡。

2．對光

轉動轉換器，使低倍物鏡正對通光孔。左眼注視目鏡內，右眼同時睜開，用手轉動反光鏡，面向光源。在目鏡里看見一個圓形、明亮的視野（一定要用非直射光）。把一個較大的光圈對準通光孔。

3．低倍鏡的使用

觀察任何標本都必須先用低倍鏡。

（1）放置切片　升高鏡筒，把玻片標本放在載物臺中央，標本材料正對通光孔的中心，用壓片夾壓住載玻片的兩端。

（2）調焦　兩眼從側面注視物鏡，轉動粗準焦螺旋，讓鏡筒徐徐下降，至物鏡距玻片2～5㎜處。然后用左眼注視目鏡，右眼同時睜開，（以便繪圖），同時用手反方向（逆時針方向）轉動粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩上升，直到看清物像為止。如果不夠清楚，可用細準焦螺旋調節。（不可以在調焦時邊觀察邊使鏡筒下降，以免壓碎裝片和鏡頭。）

（3）低倍鏡的觀察  由所用的目鏡放大倍數與物鏡放大倍數相乘，即為原物被放大的倍數。如果物像不在視野中央，要慢慢移動到視野中央，適當再進行調節。

4．高倍鏡的使用

（1）選好目標  先用低倍物鏡確定要觀察的目標，將其移至視野中央。轉動轉換器，把低倍物鏡輕輕移開，原位置小心換上高倍物鏡。（用高倍物鏡工作距離較短，操作要十分仔細，以防鏡頭碰擊玻片）。

（2）調焦  在正常情況下，當高倍物鏡轉正之后，在視野中央即可見到模糊的物像，只要向反時針方向略微調動細準焦螺旋，既可獲得清晰的物像。

在換上高倍物鏡觀察時，視野變小變暗，要重新調節視野亮度，可升高聚光器或利用凹面反光鏡。

5．油鏡的使用（中學生一般不使用，在這里不做詳述）

6．使用后的整理

觀察結束，應先將鏡筒升高，聚光器下降，再取下切片，然后轉動轉換器，使物鏡與通光孔錯開，做好清潔工作。清潔完畢，再下降鏡筒，使兩個物鏡位于載物臺上通光孔的兩側，呈“八”字形，將反光鏡轉至與載物臺垂直，罩上防塵罩，仍用右手握住鏡臂，左手平托鏡座，按號放回鏡箱中。

討論

1．降低鏡筒時，操作者*關鍵的姿勢應該是什么？其重要性是什么？

2．當視野太明亮，光線刺眼時，這樣的光線會使人眼的視網膜長久性損壞。其原因和解決的方法是什么？

提示

1．降低鏡筒時，一定要從旁邊注視物鏡和玻片，防止它們接觸和壓碎蓋玻片、磨損透鏡。

2．原因是：（1）反光鏡直對強光源或用反光鏡捕捉直射的太陽光；（2）光線直射到物鏡的透鏡上。

解決方法：用平面鏡、小光圈、加濾光片、轉向暗處；移動顯微鏡的位置

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